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科研抗原

簡(jiǎn)要描述:

科研原的類別有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、科研、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測(cè)試劑盒。

更新時(shí)間:2020-03-30

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科研抗原

產(chǎn)品名稱:科研抗原
英文名稱:
規(guī)格:50T
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A)                                   毫升
染色液(t B)                                   微升
稀釋液(C)                                   毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

科研抗注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA試劑盒 雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 18,IL-18 ELISA試劑盒 雞白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 1β,IL-1β ELISA試劑盒 雞白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Mouse Chicken Interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒 雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA試劑盒 雞白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒 雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse Chicken Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒 雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA試劑盒 雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒

 細(xì)胞名稱 Mouse Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA試劑盒 雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 種屬 Chicken Laminin,LN ELISA試劑盒 雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 

人羊膜上皮細(xì)胞 Human Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA試劑盒 雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 Human Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA試劑盒 雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA試劑盒 雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA試劑盒 雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒

 細(xì)胞名稱 Human Chicken major histocompatibility complex,MHC/B ELISA試劑盒 雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)ELISA試劑盒

NRK-52E,大鼠腎細(xì)胞 種屬 Chicken Myoglobin,MYO/MB ELISA試劑盒 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA試劑盒

H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) Rattus Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA試劑盒 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

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