產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST
RNAfixer 無液氮 RNA 樣品儲存液公司正在出售的產(chǎn)品:鴨胚肝間質(zhì)細(xì)胞(永生化) G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y12封閉多肽 滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA檢測試劑盒 6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)酶活性比色法檢測試劑盒 ?,F(xiàn)青霉 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體
更新時(shí)間:2024-01-12
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
A-Hc2012 | RNAsafe 高效 RNase 滅活劑 | 5ml |
保存條件:-20℃保存半年以上。
產(chǎn)品介紹:
RNAsafe 含有數(shù)種特殊化合物,可使 RNase 失活,高效去除各種溶液或者反應(yīng)緩沖液中可能存在的 RNase,從而防止 RNA 的降解。RNAsafe 可用于制備 RNA 懸浮液,并可加入到各種 RNA 的反應(yīng)液中(如體外轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、RT-PCR、探針制備、分子雜交、Nuclease Protection Assay 等)。滅活可能存在的微量 Rnase 污染,保持 RNA 穩(wěn)定性,獲得更佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 適合于各種緩沖液,包括不能由DEPC處理的Tris及MOPS緩沖液系統(tǒng)等。
2. 安全,方便地去除溶液中微量的RNase。
3. 處理過的溶液隨時(shí)可以再處理(60℃ 10-20 min),以去除任何可能發(fā)生的后續(xù)RNase污染。
4. 不影響逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA聚合酶和耐熱DNA聚合酶的活性,可用于逆轉(zhuǎn)錄和體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
5. 處理后不需高壓滅菌。
使用方法:
1. 本品為 20×濃縮液,在待處理的一般溶液或反應(yīng)緩沖液中稀釋 20×RNAsafe 到終濃度為 1×的工作濃度。如:95μl 待處理溶液中可加 5μl RNAsafe。
2. 60℃處理 20 min 以使 RNase 失活。經(jīng) RNAsafe 處理后的溶液冷卻至室溫即可使用。處理過的溶液可再次處理(60℃ 10-20 min),以去除存儲過程中可能發(fā)生的 RNase 污染。溶液冷卻到室溫后再加入逆轉(zhuǎn)錄酶等對高溫敏感的酶制劑。
PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?
試劑:
模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
設(shè)備:
PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時(shí)不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動提取核酸。 這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。
PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):
PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個(gè)循環(huán)組成,每個(gè)循環(huán)包括以下3個(gè)步驟:
一、變性:
利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個(gè)循環(huán)之前,通常加熱長一些時(shí)間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。
二、退火或稱接合,復(fù)性:
在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯(cuò)誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯(cuò)誤地結(jié)合。該步驟時(shí)間1-2分鐘。
三、延伸:
DNA聚合酶由降溫時(shí)結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時(shí)間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。
PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:
1、變性溫度和時(shí)間:
保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復(fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時(shí)間過長,可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。
2、復(fù)性溫度和時(shí)間:
PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。
3、延伸溫度和時(shí)間:
一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個(gè)核苷酸時(shí),過高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時(shí)間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時(shí)間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時(shí)間。這里需要注意,延伸時(shí)間過長可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時(shí)間。
4、循環(huán)數(shù):
其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。
公司正在出售的產(chǎn)品:
頭狀葡萄球菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4ELISA試劑盒 UGT2B4免費(fèi)代測試劑 | 甲型流感(感)病毒M2亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
地龍染料法PCR鑒定試劑盒 | 表皮膜蛋白3ELISA試劑盒 EMP3免費(fèi)代測試劑 | 猿皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書 |
腎綜合癥漢坦病毒ⅠⅡ型通用PCR檢測試劑盒 | 補(bǔ)體成分2ELISA試劑盒 | 耐萬古腸球菌PCR檢測試劑盒 |
雅氏瓦螨PCR檢測試劑盒 | 補(bǔ)體1抑制物抗體-IgMELISA試劑盒 | 納米小孢子菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
蓮子探針法PCR鑒定試劑盒 | 超敏生長激素ELISA試劑盒 | 伯克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
犬腺體病毒1型(犬傳染性肝炎病毒)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 叢狀蛋白A3ELISA試劑盒 | 乙型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒 |
犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 | 單純皰疹病毒抗原-1ELISA試劑盒 | 牛痘病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
痢疾桿菌PCR檢測試劑盒 | 蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 | 馬立克氏病病毒1型PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)因子亞基18ELISA試劑盒 | 綿羊鞭蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng) |
犬鏈球菌PCR檢測試劑盒 | 動力蛋白激活蛋白4ELISA試劑盒 | 耐久腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
柯薩奇病毒 A2 型核酸檢測試劑盒 | 人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 試劑盒ELISA | 牛副結(jié)核分歧桿菌(MPB)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
病毒 H7N9 變異株( HPAI-H7)核酸檢測試劑盒 | 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 | 禽腺病毒D型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
豬囊尾蚴染料法熒光定量PCR試劑盒 | RNAsafe 高效 RNase 滅活劑人鈣離子通道抗體(IgG)檢測試劑盒elisa | 黃綠青霉PCR檢測試劑盒 |
肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 人MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)試劑盒ELISA | 犬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
微生物致病菌PCR快速檢測系列 | 人白介素35(IL-35)ELISA檢測試劑盒 | 牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |